El sexado de semen se utiliza en mamíferos para poder elegir el sexo de las crías. Esta técnica se basa en la diferencia del contenido de ADN que existe entre los espermatozoides X (que dan origen a hembras) y los espermatozoides Y (que dan origen a machos). En los bovinos los espermatozoides X tienen un 3.8% más de ADN que los Y. Procedimiento .......................................................................................... Los eyaculados aprobados para ser sexados (motilidad progresiva mayor o igual al 60% y concentración mayor a 1 x 109espermatozoides/ml) son teñidos con un colorante que se une al ADN. Este colorante tiene la particularidad que produce fluorescencia cuando es sometido a la luz de un láser. A mayor cantidad de ADN (espermatozoides con cromosoma X), mayor fluorescencia. Para poder detectar la diferencia de fluorescencia y separar los espermatozoides deseados se utiliza un citómetro de flujo. El mismo está diseñado para alinear y detectar los espermatozoides presentes en microgotas para su posterior separación. La fluorescencia detectada que produce cada espermatozoide es procesada por un software que permite al operador seleccionar la población espermática con mínima o máxima luminosidad, según el sexo requerido. Los espermatozoides seleccionados son así desviados del flujo original y recolectados en un tubo para su posterior congelación. Se pueden congelar dosis de 3 millones de espermatozoides, las que se utilizan para inseminación artificial y dosis de 10 millones para uso en transferencia de embriones; ambas se envasan en minipajuelas (0.25 ml). Luego de la congelación, se evalúa la motilidad progresiva y la pureza (proporción del sexo elegido presente) de las dosis producidas, las que deben tener un mínimo de 35% de espermatozoides mótiles y 85% de pureza para la aprobación de las mismas. Nuestro laboratorio cuenta con tres citómetros de flujo que funcionan las 24 horas del día, dirigidos por tres equipos de profesionales.
|