Metodología
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1) Tratamiento de Superestimulación Hormonal
Las vacas son superestimuladas hormonalmente, tratamiento que permite el crecimiento de varios folículos que contienen a los ovocitos.

2) Punción Ovárica Transvaginal
Los folículos se localizan y se punzan con la guía de un ecógrafo transvaginal que contiene una aguja acoplada a una bomba de vacío la cual permite aspirar el líquido folicular y el ovocito.

3) Búsqueda de Ovocitos
El líquido aspirado se vierte en un placa de Petri y se procede a la búsqueda de los ovocitos bajo una lupa.

4) Maduración Ovocitaria
Los ovocitos recuperados se ponen a madurar en un medio especial durante 22 hs en una estufa de cultivo que tiene 5% CO2 en aire y 38ª C de temperatura.

5) Fertilizaciòn In Vitro
Para llevar a cabo la Fertilización in Vitro propiamente dicha, el semen debe atravesar un proceso de selección y capacitación que le permite fecundar al ovocito de manera exitosa.

Las etapas consisten en:

• Descongelación de la pajuela del toro asignado
• Siembra de los espermatozoides en la columna de un gradiente de Percoll, medio que pemite separar los espermatozoides vivos de los muertos.
• Medición del volumen en el que se encuentran los espermatozoides
• Calculo de la concentración espermática
• Dilución del semen a una concentración de fertilización de 1.5 millones de espermatozoides/ml.

Una vez que la concentración de fertilización es la adecuada, se procede a la Fertilización In Vitro propiamente
dicha, que implica reunir los espermatozoides y los ovocitos en una gota de un medio especifico y llevarlos a una
estufa de cultivo que contiene 5% CO2 en aire a 38º C durante 18-20hs.

6) Cultivo in Vitro
Pasadas las 18-20 hs necesarias para que el espermatozoide fecunde al ovocito, se procede a denudar los ovocitos que consiste en desprender del mismo a las células de la granulosa, las cuales lo rodean como si fuera una corona.
De esta forma el ovocito fecundado, en el medio especifico, se lleva a una estufa cuya característica principal es el bajo porcentaje de oxigeno en su ambiente. Se inicia así la etapa que se denomina “Cultivo” en la cual, durante 6-7 días se llevará a cabo la división celular hasta llegar al estadio de mórula o blastocito, evolución que denominamos desarrollo embrionario.

7) Transferencia Embrionaria
Los embriones obtenidos in vitro son transferidos a hembras receptoras que fueron hormonalmente sincronizadas para la recepción del embrión.

8) Ecografía Diagnóstica
A las tres semanas de la transferencia embrionaria se realiza la primer ecografía diagnóstica para constatar preñez.
La misma se reconfirma a los 60 días de gestación.